ערכת גילוי מוטציות KRAS 8 (PCR פלואורסצנטי) - RUO
שם המוצר
ערכת גילוי מוטציות KRAS 8 (PCR פלואורסצנטי) - RUO
אֶפִּידֶמִיוֹלוֹגִיָה
מוטציות נקודתיות בגן KRAS נמצאו במספר סוגי גידולים אנושיים, שיעור מוטציות של כ-17%~25% בגידול, שיעור מוטציות של 15%~30% בחולי סרטן ריאות, ושיעור מוטציות של 20%~50% בחולי סרטן המעי הגס. מכיוון שחלבון P21 המקודד על ידי הגן K-ras ממוקם במורד הזרם של מסלול האיתות של EGFR, לאחר המוטציה בגן K-ras, מסלול האיתות במורד הזרם תמיד מופעל ואינו מושפע מתרופות המכוונות במעלה הזרם על EGFR, וכתוצאה מכך מתפשט תאים ממאיר ומתמשך. מוטציות בגן K-ras מעניקות בדרך כלל עמידות למעכבי טירוזין קינאז EGFR בחולי סרטן ריאות ועמידות לתרופות נוגדנים אנטי-EGFR בחולי סרטן המעי הגס [1, 2, 3]. בשנת 2008, פרסמה הרשת הלאומית המקיפה לסרטן (NCCN) הנחיה קלינית לסרטן המעי הגס והרקטום, אשר הצביעה על כך שאתרי המוטציה הגורמים להפעלת K-ras ממוקמים בעיקר בקודונים 12 ו-13 של אקסון 2, והמליצה שכל החולים עם סרטן המעי הגס והרקטום גרורתי מתקדם יוכלו להיבדק למוטציה ב-K-ras לפני הטיפול [4]. לכן, גילוי מהיר ומדויק של מוטציה בגן K-ras הוא בעל חשיבות רבה בהנחיות קליניות לטיפול תרופתי. ערכת זו משתמשת ב-DNA כדגימה לגילוי כדי לספק הערכה איכותית של מצב המוטציה, שיכולה לסייע לרופאים בסריקת סרטן המעי הגס והרקטום, סרטן ריאות וגידולים אחרים המפיקים תועלת מתרופות ממוקדות. תוצאות הבדיקה של הערכה הן לעיון קליני בלבד ואין להשתמש בהן כבסיס בלעדי לטיפול אישי בחולים. על הרופאים לקבל שיפוטים מקיפים על סמך גורמים כגון מצב המטופל, אינדיקציות לתרופות, תגובת הטיפול ומדדי בדיקות מעבדה אחרים.
פרמטרים טכניים
| אִחסוּן | ≤-18℃ |
| חיי מדף | 12 חודשים |
| סוג הדגימה | חתכים פתולוגיים משובצים בפרפין אנושי |
| CV | ≤5.0% |
| אישור חוק (LoD) | א) בופר תגובה K-ras A ובופר תגובה K-ras B יכולים לזהות ביציבות קצב מוטציה של 1% תחת רקע של 3 ננוגרם/μL מסוג בר; ב) מוטציה של 1×103ניתן לזהות ביציבות עותקים/מ"ל ברקע מסוג בר של 1×105עותקים/מ"ל כאשר שיעור המוטציה הוא 1%; ג) כאשר נבדקת בדיקת SW3 של בדיקת LoD של החברה, אין ערך Ct או שערך Ct = 0 של בופר תגובה A ובופר תגובה B |
| מכשירים רלוונטיים | מערכות PCR בזמן אמת מבית Applied Biosystems 7500, מערכות PCR בזמן אמת מבית Applied Biosystems 7300, מערכות PCR בזמן אמת מבית QuantStudio®5, מערכת PCR בזמן אמת מבית LightCycler® 480, מערכת PCR בזמן אמת מבית BioRad CFX96. |
זרימת עבודה
ריאגנט נדרש אך לא סופק:H2O ללא DNase/RNase, אתנול נטול מים. בעת בדיקת דגימת רקמה משובצת בפרפין, מומלץ להשתמש בערכת הרקמה QIAamp DNA FFPE של QIAGEN (56404) ובערכת החילוץ המהירה של DNA משובץ בפרפין (DP330) של QIAGEN, המיוצרת על ידי Tiangen Biotech(Beijing) Co., Ltd.
חומרים מתכלים נדרשים אך לא מסופקים:קצוות צנטריפוגה ללא DNase/RNase, כפפות חד פעמיות, צינור צנטריפוגה ללא DNase/RNase, רצועות של 8 צינורות, צנטריפוגה.
