15 סוגים של mRNA של גן E6/E7 של נגיף הפפילומה האנושי בסיכון גבוה
שם המוצר
ערכת גילוי mRNA של גנים מסוג HWTS-CC005A-15 עבור נגיף הפפילומה האנושי E6/E7 בסיכון גבוה (PCR פלואורסצנטי)
אֶפִּידֶמִיוֹלוֹגִיָה
סרטן צוואר הרחם הוא אחד מסוגי סרטן הנשים הנפוצים ביותר ברחבי העולם, והופעתו קשורה קשר הדוק לנגיפי הפפילומה האנושיים (HPV), אך רק חלק קטן מזיהומי HPV יכולים להתפתח לסרטן. HPV בסיכון גבוה מדביק תאי אפיתל צוואר הרחם ומייצר שני אונקופרוטאינים, E6 ו-E7. חלבון זה יכול להשפיע על מגוון חלבונים תאיים (כגון חלבוני מדכאי הגידול pRB ו-p53), להאריך את מחזור התא, להשפיע על סינתזת ה-DNA ויציבות הגנום, ולהפריע לתגובות חיסוניות אנטי-ויראליות ונוגדות גידולים.
עָרוּץ
| עָרוּץ | רְכִיב | גנוטיפ שנבדק |
| משפחה | בופר תגובת HPV 1 | HPV16, 31, 33, 35, 51, 52, 58 |
| VIC/HEX | גן β-אקטין אנושי | |
| משפחה | בופר תגובת HPV 2 | HPV 18, 39, 45, 53, 56, 59, 66, 68 |
| VIC/HEX | גן INS אנושי |
פרמטרים טכניים
| אִחסוּן | נוזל: ≤-18℃ |
| חיי מדף | 9 חודשים |
| סוג הדגימה | מטוש צוואר הרחם |
| Ct | ≤38 |
| CV | <5.0% |
| חוק הביטחון | 500 עותקים/מ"ל |
| מכשירים רלוונטיים | מערכת PCR בזמן אמת של Applied Biosystems 7500מערכות PCR מהירות בזמן אמת של Applied Biosystems 7500 מערכות PCR בזמן אמת של QuantStudio®5 מערכות PCR בזמן אמת SLAN-96P מערכת LightCycler®480 PCR בזמן אמת מערכת גילוי PCR בזמן אמת LineGene 9600 Plus ציקל תרמי כמותי בזמן אמת MA-6000 מערכת PCR בזמן אמת BioRad CFX96 מערכת PCR בזמן אמת BioRad CFX Opus 96 |
זרימת עבודה
ריאגנט מומלץ לחילוץ: ערכת Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Kit (HWTS-3020-50-HPV15) של Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. יש לבצע את החילוץ אך ורק בהתאם להוראות השימוש. נפח האלוציה המומלץ הוא 50 מיקרוליטר. אם הדגימה לא עוכלה לחלוטין, יש להחזיר אותה לשלב 4 לעיכול חוזר. לאחר מכן, יש לבדוק בהתאם להוראות השימוש.
ריאגנט מומלץ לחילוץ: ערכת RNAprep Pure Animal Tissue Total RNA Extraction Kit (DP431). יש לבצע את החילוץ בהתאם להוראות השימוש בקפדנות (בשלב 5, יש להכפיל את ריכוז תמיסת העבודה DNaseI, כלומר, יש לקחת 20 מיקרוליטר של תמיסת סטוק DNaseI נטולת RNase (1500U) לתוך צינור צנטריפוגה חדש ללא RNase, להוסיף 60 מיקרוליטר של בופר RDD ולערבב בעדינות). נפח השחרור המומלץ הוא 60 מיקרוליטר. אם הדגימה לא עוכלה לחלוטין, יש להחזיר אותה לשלב 5 לעיכול חוזר. לאחר מכן, יש לבדוק בהתאם להוראות השימוש.
